[RuanLab]病毒构建
🔬说在前面:
默认做好无菌规范操作,不再强调;
病毒操作的枪头应丢入84瓶中;
病毒4℃不能保存太久
⚠️注意事项
本指南仅个人记录,且仅供参考,若因参考本指南造成任何后果,本人不承担任何责任!
元件比例:
- 目的片段:元件 = 3 : 1 : 1 : 1
- 质量:2μg : 0.67μg : 0.67μg : 0.67μg
- PEI:1μg 质粒对应 3μL PEI + 100μL 培养基
操作步骤:
- 拿2个离心管,分别加入:
- 目的片段+元件(共4μg)+ 200μL培养基
- PEI 12μL + 200μL培养基
- 混合,反应15min;
- 取6孔板,每个孔种入 400W~500W 的293T细胞;
- 加入反应完的混合液,每个孔补充培养基到2mL
- 96h后收取
- 收集液体,1700rpm,离心10min
- 取上清,保存
[RuanLab]病毒构建
http://blog.dataseven.fun/2026/04/19/RuanLab-病毒构建/